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如何配制teknova培養(yǎng)基?有哪些步驟?

發(fā)布日期:2022-11-17      點(diǎn)擊:1231
  pH值是培養(yǎng)基的常規(guī)監(jiān)控項(xiàng)目,微生物的生長(zhǎng)不僅依賴(lài)豐富的營(yíng)養(yǎng),還需要在適宜的pH值范圍內(nèi)才能正常生長(zhǎng)繁殖或體現(xiàn)其生物特性。因此,teknova培養(yǎng)基pH值是否符合要求直接影響微生物檢驗(yàn)結(jié)果。
  
  teknova培養(yǎng)基的配制:
  
  配料—溶解—調(diào)PH—過(guò)濾—分裝—包扎—滅菌—擺斜面—貯存
  
  1、配料:配方換算→在容器中加入少量水(蒸餾水,自然水)→按照配方稱(chēng)取各種藥品(依次加入)→加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。
  
  2、溶解:淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀。加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。
  
  3、調(diào)PH:用1N的鹽酸溶液或1N的NaOH溶液把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。
  
  4、過(guò)濾:濾紙或棉花進(jìn)行過(guò)濾。(有時(shí)可以省去)
  
  5、分裝:一般teknova培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。
  
  (1)三角瓶
  
  若作靜置培養(yǎng),則100mL培養(yǎng)基/250mL的三角瓶,不能超過(guò)150mL培養(yǎng)基/250mL的三角瓶,否則滅菌時(shí)培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),則15-20mL培養(yǎng)基/250mL的三角瓶,保證通氣良好。
  
 ?。?)試管分裝
  
  液體培養(yǎng)基一般裝4-5mL,約試管的1/4高度;固體斜面培養(yǎng)基一般裝3-4mL,約試管的1/5高度。
  
  6、包扎:分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時(shí)水份進(jìn)入把棉塞弄濕。
  
  7、滅菌:按配方上要求的溫度、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)被破壞,培養(yǎng)基中的糖、氨基酸會(huì)使培養(yǎng)基的顏色變深。
  
  8、擺斜面:滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個(gè)斜面,約占試管長(zhǎng)度的1/2。
  
  9、貯存:teknova培養(yǎng)基在30℃下放置一天,無(wú)污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。

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