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Megazyme試劑盒抗性淀粉的測(cè)定方法

發(fā)布日期:2022-02-23      點(diǎn)擊:1094
  Megazyme試劑盒用于分析a-葡聚糖(包括淀粉,糖原,植物糖原和非抗性麥芽糊精),一個(gè)樣品溶液的重復(fù)測(cè)定中,吸收值會(huì)有0.005至0.010的波動(dòng)。當(dāng)樣品體積為1ml時(shí),這相當(dāng)于0.05-1ml/L濃度的D-葡萄糖。如果樣品在準(zhǔn)備過(guò)程中被稀釋,結(jié)果需要乘以稀釋倍數(shù)。例如在樣品準(zhǔn)備時(shí),樣品稱重,如10g/L,變異范圍將在0.02至0.05g/100g。
  抗性淀粉的測(cè)定方法:樣品使用淀粉葡糖苷酶(AMG)37℃振蕩水浴孵育16小時(shí),在這期間,通過(guò)兩種酶的聯(lián)合作用,非抗性淀粉被溶解,水解成D-葡萄糖,孵育結(jié)束后,終止反應(yīng)。離心上述溶液,收集上清勿棄,底部殘留絮狀團(tuán)即為樣品中的RS,用含水的IMS洗滌絮狀團(tuán),洗滌后離心,再重復(fù)一次洗滌離心,收集離心后獲得的上清,與之前收集的上清混合。D-葡萄糖用葡糖氧化酶/過(guò)氧化物酶試劑測(cè)定,這也是對(duì)樣品中RS含量的測(cè)定,非抗性淀粉(可溶性淀粉)的測(cè)定可通過(guò)集中的上清液并定容至100mL,再用GOPOD測(cè)定D-葡萄糖完成。
  Megazyme試劑盒檢測(cè)原理:洗滌后離心,再重復(fù)一次洗滌離心,收集離心后獲得的上清,與之前收集的上清混合。小心倒出試管殘留的液體,將絮狀團(tuán)置于冰水浴中,加入2MKOH溶解,邊溶解邊用磁力攪拌機(jī)劇烈攪拌。用醋酸鹽緩沖液將溶液調(diào)至中性,用AMG將淀粉定量水解為葡萄糖。D-葡萄糖用葡糖氧化酶/過(guò)氧化物酶試劑(GOPOD)測(cè)定,這也是對(duì)樣品中RS含量的測(cè)定。

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